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人食管上皮細(xì)胞永生化；SHEE
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
人食管上皮細(xì)胞永生化；SHEE正在出售的產(chǎn)品：盤羊皮膚細(xì)胞;OAM-S1 Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 CSNK2A2 Others Human 人 CSNK2A2 / CK2A2 桿狀病毒-
人食管上皮細(xì)胞永生化；SHEE
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
種屬來源；人
組織來源；食管
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管
支原體檢測；無
培養(yǎng)基；90%DMEM+10%FBS
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
半乳糖凝集素7(GAL7)重組蛋白 Recombinant Galectin 7 (GAL7)
CD276 Protein Human 重組人 B7-H3 / CD276 蛋白
IGSF8重組小鼠 PGRL / IGSF8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD86 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白
CD58重組人 LFA-3 / CD58 蛋白 Protein
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CD86 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD86 / B7-2 蛋白
小鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand (sAIL) ELISA Kit 人可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)檢測試劑盒
Human17-ketosteroids,17-KSELISAKit 人17-酮類固醇(17-KS)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD3(Human1,25-dihydroxyvitaminD3)ELISAKit人1,25二羥基3
飲料糖精(saccharin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
人食管上皮細(xì)胞永生化；SHEE小鼠脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠脂多糖（LPS）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠多巴胺D2受體配體(D2RL)檢測試劑盒 ，英文名： D2RL ELISA Kit
Porcine heat shock protein 20 (HSP-20) ELISA Kit 豬熱休克蛋白20(HSP-20)檢測試劑盒
蝦特定基因序列(FC)核酸檢測試劑盒 48T
CLIAKitforLUM(Humanlumican)ELISAKit人基膜聚糖/內(nèi)腔蛋白
體液總抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量檢測試劑盒50次
ELISAKitHA雞透明質(zhì)酸
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
