細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

SK-OV-3+LUC人卵巢癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞介紹

SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。 此細(xì)胞對(duì)腫瘤壞死因子和幾種細(xì)胞毒性包括白喉、均耐受。 在裸鼠中致瘤，且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。

細(xì)胞特性

1） 來源：卵巢腺癌，腹水轉(zhuǎn)移

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣  貼壁生長

3） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子α(NFKBIA)檢測試劑盒 ，英文名： NFKBIA ELISA Kit

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MouseNeuroglobin,NGBELISAKit 小鼠腦紅蛋白(NGB)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumaissuefactor,IFELISAKit人組織因子

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ELISAKitLDH大鼠乳酸脫氫酶

CD28重組小鼠 CD28 蛋白 Protein

ADH/AVP peptide 抗利尿激素/血管升壓素抗原(和肽素 1mgADH/AVP peptide 抗利尿激素/血管升壓素抗原(和肽素)

ENTPD2重組人 NTPDase 2 / ENTPD2 蛋白 (aa 29-460, His 標(biāo)簽) Protein

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

ADH/AVP peptide 抗利尿激素/血管升壓素抗原(和肽素 1mgADH/AVP peptide 抗利尿激素/血管升壓素抗原(和肽素)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

CD28重組小鼠 CD28 蛋白 Protein

TNFSF9 Protein Rat 重組大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

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SK-OV-3+LUC人卵巢癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記小鼠肝脂酶(HL)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒

Humanferritin,FEELISAKit 人鐵蛋白(FE)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAi-tissueanGSlaminaseIgA,tTG-IgA檢測試劑盒人抗組織轉(zhuǎn)酶抗體IgA(tTG-IgA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氧化型(GSSG)濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒50次

HumanansformingGrowthfactorβ1，TGF-β1ELISAKit人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠6--前列腺素F1a(mouse 6-k-PGF1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠前列腺素E2(mouse PGE2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠0脂酶A2(mouse sPLA2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠Pleioophin（mouse Pleioophin）   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝