小鼠胚胎干細胞;ES-E14TG2a

本公司所有產品僅供科學實驗，不做其他科學實驗外的使用！

商品詳情：

細胞別稱；ES-E14TG2a；小鼠胚胎干細胞

種屬來源；小鼠

組織來源；胚胎

生長特性；貼壁生長

細胞形態；球形克隆細胞樣

細胞代數；10代以內

背景簡介；ES-E14TG2a細胞缺乏HGPRT（HPRT），并且對0.06 mM的6-硫有抗性。當在飼養層（胚胎成纖維細胞或STO細胞）上培養時，細胞保持未分化狀態。在沒有飼養層的情況下，細胞自發分化并形成胚胎結構。當注入胚泡中時，細胞可以進入生殖系。在常規的分子基因修飾技術之后，它們可用于重構小鼠胚胎。

細胞規格；1x106cells/T25或1mL凍存管

細胞培養操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。

3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。

b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞培養注意事項 ：

一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。

二、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。

三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。

四、貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

五、 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產品：

大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測試劑盒 ，英文名： PⅠCP ELISA Kit

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IL13RA1重組人 IL13RA1 蛋白 (His 標簽) Protein

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HAVCR2 Protein Human 重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標簽)

streptomycin/OVA 鏈偶聯血藍蛋白 5mgstreptomycin/OVA 鏈偶聯血藍蛋白

FGF16 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 FGF16 / FGF-16 蛋白

FKBP14重組人 FKBP14 蛋白 (His 標簽) Protein

HAVCR2 Protein Human 重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標簽)

IL13RA1重組人 IL13RA1 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠胚胎干細胞;ES-E14TG2a小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA 試劑盒

Rat brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 大鼠腦素/腦尿肽(BNP)檢測試劑盒

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Humanasialoglycoproteieceptor,AGSPR檢測試劑盒人去唾液酸糖蛋白受體(AGSPR)檢測試劑盒

植物源性食品苦杏仁(apricotkernels)試劑盒20次

Humahymopein,TP-5ELISAKit人五肽(TP-5)檢測試劑盒

無內毒素質粒大量提取試劑盒   5T

Endo-freePlasmidMaxiKit   10T

無內毒素質粒小量提取試劑盒   50T

Endo-freePlasmidMiniKit   100T